梯度液相色譜儀是一款新型的液相色譜儀，梯度系統(tǒng)的應用范圍比等度系統(tǒng)更廣，等度系統(tǒng)不能很好分離的物質(zhì)，使用梯度程序便能迎刃而解，可設定自動清洗程序而不需手動更換流動相，使色譜柱的清洗更方便，廣泛用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗、食品檢測、化工分析、環(huán)境監(jiān)測等眾多分析領域。
梯度洗脫又稱為梯度淋洗或程序洗脫。氣相色譜中為改善對寬沸程樣品的分離和縮短分析周期，廣泛采用程序升溫的方法。而在液相色譜中則采用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中，按一定程度不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。從而可以使一個復雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。
梯度洗脫原理是流動相由幾種不同極性的溶劑組成，通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性，使每個流出的組分都有合適的容量因子k，并使樣品種的所有組分可在最短時間內(nèi)實現(xiàn)最佳分離。
梯度洗脫可提高柱效，改善檢測器的靈敏度。當樣品中的一個峰的k值和最后一個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時，使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證流速的穩(wěn)定，必須使用恒流泵，否則難獲重復結果。梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑A和一個強極性的溶劑B。
梯度液相色譜儀洗脫應滿足以下要求：
1.洗脫液體積應足夠大，一般要幾十倍于床體積，從而使分離的各峰不致于太擁擠。
2.梯度的上限要足夠高，使緊密吸附的物質(zhì)能被洗脫下來。
3.梯度不要上升太快，要恰好使移動的區(qū)帶在快到柱末端時達到解吸狀態(tài)。
目的物的過早解吸，會引起區(qū)帶擴散；而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。
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